Meme lunes, 10 de febrero de 2014

EXTRACCIÓN CASERA DE ADN DE LA MUCOSA BUCAL


MATERIALES:
Agua mineral
 Palillo o varilla de vidrio
Vasos desechables
Sal común
 Detergente lavavajillas
 Alcohol de 96º muy frío
 Cucharillas de plástico
 Tubo de ensayo

  1. Preparar un tubo de ensayo con alcohol etílico de 96 ºpor cada alumno y poner a enfriar lo máximo que sea posible,por ejemplo en baño de agua con hielo,mientras se realizan los pasos siguientes.

  2. Poner un poco de agua en un vaso y enjuagarse la boca enérgicamente durante al menos medio minuto para arrastrar el mayor número posible de células de descamación de la mucosa bucal (antes de hacerlo conviene haber tragado saliva para eliminar la acción de los enzimas contenidos en ella).

  3. Mientras tanto pondremos una pequeña cantidad de agua destilada (o mineral) en el mismo vaso, unos 20ml, y añadimos dos pizcas de sal común y un par de gotas de detergente lavavajillas.

  4. Expulsar el agua en el vaso de precipitados sobre la solución anterior. Dejaremos actuar durante unos 10 minutos, removiendo de vez en cuando suavemente para disolver estos componentes evitando la formación de espuma.
  1. A continuación, añadir la solución suavemente al tubo de ensayo que contiene el alcohol muy frío dejándola resbalar por la pared del tubo inclinado. El filtrado, más denso que el alcohol y algo turbio, se deposita en el fondo del tubo. Dejar reposar durante 2 ó 3 minutos sin moverlo en absoluto. El alcohol formará un sobrenadante por encima de la fase acuosa, en la que se encuentra el ADN en disolución, provocando que éste precipite..
     
  2. Esperar unos minutos mientras el ADN precipita en la interfase alcohol-agua formando una masa blanquecina que asciende lentamente formando un grumo de aspecto algodonoso.
  1. Tras unos minutos de reposo, el ADN tiende a subir hacia la superficie del alcohol.

  2. Entonces podremos recogerlo utilizando una varilla de vidrio, una pipeta Pasteur o simplemente un palillo. Para ello, se introduce en la masa de ADN y se extrae suavemente mientras se hace girar entre los dedos.

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EXTRACCIÓN CASERA DE ADN DEL PLÁTANO



MATERIALES:

1.- Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un baño de hielo triturado:
  • 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
  • 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
  • 5 g de bicarbonato sódico.
  • 5 ml de detergente líquido o champú.
2-. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.
3.- Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Y así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.
4.- Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.
5.- Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Se tiene que dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol va a quedar flotando sobre el tampón.
6- Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado

Leer más: http://www.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccion-adn/informe-experimento-extraccion-adn.shtml#ixzz2su6DkTEw





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EXTRACCIÓN CASERA DEL  ADN DE TOMATE



Materiales:
  1. Un tomate.
  2. Agua destilada (120 ml).
  3. Jabón líquido o champú (5 ml).
  4. Colador.
  5. Tubo de ensayo.
  6. Sal (1 cucharada).
  7. Alcohol (10 ml).
Preparación:
  1. Se licúa el tomate con un poco de agua para obtener una pulpa del mísmo. Aparte se mezcla el agua, la sal y el jabón líquido.
  2. Se extrae de cada preparación 5 ml, se mezclan y se añade en un tubo de ensayo, luego se le agrega poco a poco los 10 ml de alcohol por las paredes del tubo. 
  3. Se podrá notar el ADN del tomate como una capa entre el preparado y el alcohol.
EXPLICACIÓN:
  • La solución de jabón líquido y sal ayudada por la acción de la licuadora es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear.
  • El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua.