domingo, 9 de febrero de 2014
EXTRACCIÓN CASERA DEL ADN DE CEBOLLA
Materiales:
- Una cebolla.
- Agua destilada (120 ml).
- Jabón líquido o champú (5 ml).
- Colador.
- Tubo de ensayo.
- Sal (1 cucharada).
- Alcohol (10 ml).
Preparación:
- Se licúa la cebolla con un poco de agua para obtener una pulpa de la misma. Aparte se mezcla el agua, la sal y el jabón líquido.
- Se extrae de cada preparación 5 ml, se mezclan y se añade en un tubo de ensayo, luego se le agrega poco a poco los 10 ml de alcohol por las paredes del tubo.
- Se podrá notar el ADN de la cebolla como una capa entre el preparado y el alcohol.
EXPLICACIÓN:
- La solución de jabón líquido y sal ayudada por la acción de la licuadora es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear.
- El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua.
EXTRACCIÓN CASERA DEL ADN DE CEBOLLA
MATERIALES:
- una cebolla grande fresca
- detergente lavavajillas
- sal
- agua destilada
- zumo de piña o papaya
- alcohol de 96º muy frío (puede sustituirse por vodka helado)
- un vaso de los de agua
- un vaso de cristal alto (se mantiene en la nevera hasta que vaya a utilizarse)
- un cuchillo
- una varilla de cristal
- una batidora
Procedimiento:
- Corta la zona central de la cebolla en cuadrados
- En un vaso de agua echa 3 cucharaditas de detergente lavavajillas y una de sal y añade agua destilada hasta llenar el vaso.
- Mezcla esta solución con los trozos de cebolla
- Licúa el conjunto, con la batidora, a velocidad máxima durante 30 segundos
- Filtra el líquido obtenido con un filtro de café
- Llena hasta la mitad aproximadamente un vaso de cristal alto con la disolución filtrada
- Añade 3 cucharaditas de café de zumo de piña o papaya y mezcla bien
- Añade un volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado, cuidadosamente, haciéndolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el filtrado. Puedes utilizar la varilla de vidrio o una cucharilla para ayudarte.
- Deja reposar durante 2 ó 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos capas. A continuación introduce la varilla y extrae una maraña de fibras blancas de ADN.
EXPLICACIÓN:
- La solución de jabón líquido y sal ayudada por la acción de la licuadora es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear.
- Los zumos de piña y papaya contienen un enzima, la
papaína, que contribuye a eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN.
- El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es
soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la
interfase entre el alcohol y el agua.
USO CORRECTO DEL PORTAOBJETOS Y CUBREOBJETOS
El objetivo de la preparación de muestras para microscopía optica es permitir la observación de las estructuras de lo que se desea observar, en detalles visibles a una escala menor que la agudeza visual del ojo humano.
Montaje:
* El paso final en la preparación de una muestra es montarla en una lámina de vidrio, generalmente de 25 mm x 76 mm, el portaobjetos.
* El material de montaje utilizado, el montante,puede ser bálsamo de Canadá, glicerina,
aceites, líquidos acuosos, entre otros.
* Una vez colocada la muestra en el portaobjetos y con el montante, se cubre con una lámina, disco o placa de vidrio fino, el cubreobjetos.
* El grosor del portaobjetos, el del cubreobjetos y el índice de refracción del material de montaje y su adecuación a la muestra, son factores que se deben tener en cuenta.
* El grosor del cubre es convencionalmente 0,17 mm.
* El montante debe ser inerte o actuar como preservativo frente a la degradación de la
muestra dentro de la escala de tiempo de laobservación.
INFORMACIÓN EXTRAIDA DE: PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA MICROSCOPÍA ÓPTICA
PREPARACIÓN DE MUESTRAS SEMIPERMANENTES PARA MICROSCOPÍA ÓPTICA
La preparación de muestras semipermanentes se caracterizan por ser láminas de corta duración (apróximadamente un año). El material de estudio por lo general es sometido a un colorante para poder apreciar su estructura como el azul de toluidina, azul de metileno al 1% en solución acuosa, entre otros; de igual modo se emplea glicerina al 30 % en solución acuosa.
PREPARACIÓN DE MUESTRAS TEMPORALES PARA MICROSCOPÍA ÓPTICA
Los preparados temporales se emplean para observar algunas estructuras o algún organismo "in vivo", bien sea de origen animal o vegetal, aunque también se pueden hacer con un material fijado o muerto .Tienen una corta duración, máximo de una hora debido a que el calor desprendido de la fuente de iluminación del microscopio seca el líquido que se le añade a la muestra.
Su ventaja es que son fáciles de realizar ya que no se requiere de técnicas muy especializadas para hacerlo. Para ello, se requiere de agua destilada, glicerina o simplemente agua corriente que se utiliza por ejemplo para observar organismos vivos como protozoarios. Los pasos a seguir son:
- Se selecciona o realizan los cortes finos del materia a estudiar.
- Se coloca una gota de agua en el portaobjetos seguido de la muestra.
- Con mucho cuidado se coloca el cubreobjeto de modo que no se formen burbujas.
- Si la muestra requiere de color, se debe someter a colorantes que reaccionan con las moléculas del tejido, quedandose fijado.
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